染色體畸變?cè)囼?yàn)用于鑒定在培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物體細(xì)胞中引起結(jié)構(gòu)染色體畸變的物質(zhì)。可應(yīng)用于已建立的細(xì)胞系、細(xì)胞株或原代細(xì)胞培養(yǎng)，根據(jù)培養(yǎng)生長(zhǎng)能力、核型的穩(wěn)定性、染色體數(shù)目、染色體差異以及染色體響變的自發(fā)頻率選擇合適的細(xì)胞。
染色體畸變測(cè)試程序如下：
1.染色體畸變測(cè)試可以在原代人外周血淋巴細(xì)胞(HPBL)或已建立的細(xì)胞系中進(jìn)行，例如中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞。
2.在存在和不存在代謝活化(S9)的情況下，將培養(yǎng)物與幾種濃度的測(cè)試化合物一起培養(yǎng)3到4小時(shí)，并在不存在S9的情況下培養(yǎng)21小時(shí)。
3.陽性結(jié)果的特征是異常細(xì)胞在統(tǒng)計(jì)上顯著的、劑量依賴性的增加，超過了歷史的陰性對(duì)照限制。
染色體畸變?cè)囼?yàn)操作方法：
受試物處理：在有和無代謝活化系統(tǒng)條件下，以受試物染毒處于增殖期的細(xì)胞。淋巴細(xì)胞應(yīng)在有絲分裂刺激后的48h開始染毒。一般對(duì)每個(gè)濃度和陰性/溶劑對(duì)照應(yīng)該用雙份平行培養(yǎng)物。當(dāng)本底資料可以證明雙份平行培養(yǎng)物之間變異較小時(shí)，對(duì)每個(gè)濃度改用1個(gè)培養(yǎng)物也可以接受。氣態(tài)或揮發(fā)性物質(zhì)應(yīng)以適當(dāng)?shù)姆椒ㄔ囼?yàn)，如用密閉的培養(yǎng)瓶。
收獲時(shí)間：
在一次試驗(yàn)，細(xì)胞應(yīng)在有和無代活化條件下染毒3~6h,并在染毒開始后約1.5倍的正常細(xì)胞周期時(shí)采樣。如此方案在有或無代謝活化時(shí)均為陰性結(jié)果，應(yīng)再進(jìn)行一次無代謝活化的試驗(yàn)，適當(dāng)延長(zhǎng)染毒時(shí)間。某些化學(xué)物在染毒/采樣時(shí)間長(zhǎng)于1.5倍正常細(xì)胞周期時(shí)更易檢測(cè)。在有代謝活化條件下得到陰性結(jié)果，需要根據(jù)情況予以證實(shí)。如認(rèn)為陰性結(jié)果不必進(jìn)行證實(shí)，應(yīng)提供適當(dāng)理由。
染色體制備：在收獲前以秋水仙素或秋水仙胺處理細(xì)胞培養(yǎng)物1~3h。各個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)物分別收獲和低滲、固定和染色，以制備染色體。
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